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ATCC 25922 大肠埃希菌 Escherichia coli 标准菌株
ATCC 25922 为CLSI M100指定肠杆菌科药敏质控株，用于纸片扩散法和MIC法性能验证。杭州康氧ATCC 0代原装供应。
✓ ATCC 原装 0 代
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✓ 技术支持
菌株来源与保藏信息
大肠埃希菌 ATCC 25922（Escherichia coli (Migula) Castellani and Chalmers）是全球微生物实验室中使用频率最高的药敏试验质控菌株之一。该菌株 1946 年由 FDA 西雅图实验室从临床样本中分离，后保藏于 ATCC。与 ATCC 8739（定位于防腐挑战）不同，ATCC 25922 被 CLSI M100（抗菌药物敏感性试验执行标准）指定为肠杆菌科药敏试验的推荐质控菌株，每批药敏纸片或 MIC 板的性能验证均需以本菌株进行质控测试。
ATCC 25922 全基因组已测序（GenBank CP009072），菌株不携带 ESBL、碳青霉烯酶或其他获得性耐药基因，属典型野生型敏感株。
杭州康氧以 ATCC 原装 0 代冻干粉形式提供，每批次附 ATCC 检测报告（COA），含批号信息。
生物学特性
| 特征 | ATCC 25922 表现 |
|---|---|
| 革兰染色 | 阴性短杆菌 |
| 氧化酶 | 阴性 |
| 吲哚 | 阳性 |
| MR-VP | MR 阳性 / VP 阴性 |
| 乳糖发酵 | 阳性（MacConkey 上粉红色菌落） |
| EMB 特征 | 金属绿色光泽 |
| β-内酰胺酶 | 低水平表达染色体 AmpC（不产超广谱酶） |
| 血清型 | O6 生物型 |
| 耐药谱 | 野生型——对常规抗菌药物敏感 |
| 最适温度 | 35±2°C |
大肠埃希菌 ATCC 25922 的基因组已完整测序（GenBank: CP009072）——这是 CLSI 选择它作为肠杆菌科通用质控菌株的重要原因之一：其全基因组背景已被彻底解析，不携带任何已知的获得性耐药基因（包括 ESBL、AmpC 和碳青霉烯酶基因），对抗生素的敏感谱高度稳定且可重复。25922 在 MHA 平板上的菌落形态为典型的乳白色、圆形、光滑、湿润菌落——与 35218（TEM-1 阳性）在形态上无法区分，需通过氨苄西林或阿莫西林-克拉维酸纸片试验进行表型鉴别。2023 年 CLSI M100 更新了 25922 对头孢他啶-阿维巴坦的 QC 范围——这表明即使是"老牌"质控菌株，其 MIC 范围也会随着新型抗生素的引入而持续更新。
培养条件与保藏
保藏条件
| 保藏方式 | 条件 | 期限 |
|---|---|---|
| TSA斜面(4C) | 封口膜密封 | 1-2月 |
| TSB+15%甘油(-70C) | 冻存管液氮速冻 | 2年+ |
| 冻干粉(4C) | 原装密封 | 见ATCC检测报告 |
冻干粉复苏步骤
- 在生物安全柜中开启冻干粉西林瓶。
- 用无菌注射器加入0.3-0.5mL TSB，轻轻旋转重悬。
- 转移至TSA平板或斜面，35 +/- 2C孵育18-24h。
- 复苏后挑取单菌落验证纯度，确认表型合格后投入日常使用。
| 参数 | 推荐条件 |
|---|---|
| 固体培养基 | TSA、MHA（Mueller-Hinton 琼脂，药敏试验强制使用） |
| 液体培养基 | TSB、MHB（Mueller-Hinton 肉汤，MIC 测定用） |
| 温度 | 35±2°C |
| 培养时间 | 18–24 h；药敏试验使用对数期新鲜培养物 |
⚠ 药敏试验关键提示：CLSI 要求药敏质控菌株从非选择性培养基（TSA 或 MHA）上的过夜培养物挑取单个菌落制备接种悬液。禁止使用选择性培养基（MacConkey、EMB）上的菌落，因为染料和胆盐残留可能干扰抗菌药物活性。接种悬液浓度应为 0.5 McFarland（≈1.5×10⁸ CFU/mL），必须在 15 分钟内完成接种。
保藏条件
| 保藏方式 | 条件 | 存活期限 |
|---|---|---|
| TSA 斜面（4°C） | 封口膜密封冷藏 | 1-2 个月 |
| TSB+15% 甘油（-70°C） | 冻存管，液氮速冻后转 -70°C | 2 年以上 |
| 冻干粉（4°C） | 原装密封西林瓶 | 见 ATCC 检测报告标注有效期 |
冻干粉复苏步骤
- 在生物安全柜中开启冻干粉西林瓶。
- 用无菌注射器加入 0.3-0.5 mL TSB，轻轻旋转重悬。
- 将菌悬液全部转移至 TSA 斜面或平板，35±2°C 孵育 18-24h。
- 复苏成功后挑取单菌落在 MHA 平板上划线——确认菌落形态和纯度。
- 取过夜培养的纯菌落配制 0.5 McFarland 菌悬液，接种 MHA 药敏平板——与 CLSI M100 中列出的 QC 范围核对，确认菌株对抗生素的 MIC 值在允许范围内，方可投入日常质控使用。
药敏质控应用
CLSI M100 指定质控范围
| 抗菌药物 | 纸片法抑菌圈（mm） | MIC（μg/mL） |
|---|---|---|
| 氨苄西林 | 16–22 | 2–8 |
| 头孢唑林 | 21–27 | 1–4 |
| 庆大霉素 | 19–26 | 0.25–1 |
| 环丙沙星 | 30–40 | 0.004–0.015 |
| 亚胺培南 | 26–32 | 0.06–0.25 |
| 左氧氟沙星 | 29–37 | 0.008–0.06 |
注：以上为常见药物的典型质控范围，具体以 CLSI M100 最新版为准。
药敏质控规则
每批药敏试验（纸片扩散法或 MIC 法）必须包含 ATCC 25922 作为质控菌株。质控频率：连续测试 20–30 天建立基线后，可降为每周一次。若质控值连续 2 次或 3 次中有 2 次超出范围（Westgard 规则 2₂ₛ），需排查：抗菌药物效价、培养基厚度（MHA 须 4±0.5 mm）、接种浓度、培养温度和时间。
ATCC 25922 vs ATCC 8739 分工
ATCC 25922 是药敏质控株（CLSI M100），ATCC 8739 是防腐挑战株（USP <51>）。两者不可互换——用 25922 做防腐挑战或用 8739 做药敏质控都会导致方法偏离。
常见问题
Q: 25922 的 MIC 出界了怎么办？
先排查最易出错环节：① 抗菌药物储存条件（是否在效期内、是否冻融）；② MHA 厚度（过厚=抑菌圈偏小=MIC 偏高，过薄则相反）；③ 0.5 McFarland 浊度是否准确（浊度仪须定期校准）。以上排除后仍未恢复，更换新批号 25922 重试。
Q: 25922 能做 ESBL 确认试验吗？
ATCC 25922 野生型对头孢他啶和头孢噻肟敏感（不产 ESBL），在 ESBL 表型确认试验中用作阴性质控（不加克拉维酸时敏感，加克拉维酸后抑菌圈无显著变化）。阳性对照使用 ATCC 700603（产 ESBL 肺炎克雷伯菌）。
Q: 低温存放后的 25922 接种药敏试验需提前活化吗？
需要。从 4°C 斜面或 -70°C 冻存取出的菌株，应先传代至 TSA/MHA 平板 35°C 过夜培养（第一代），再挑取单个菌落转接至新鲜平板过夜培养（第二代）——用第二代新鲜培养物制备药敏接种悬液。直接用第一代可能导致生长不均匀、抑菌圈偏小。
Q: 25922 对头孢他啶-阿维巴坦的 MIC 应该是多少？
CLSI M100 现行版本中 25922 对头孢他啶-阿维巴坦（固定阿维巴坦 4 μg/mL）的 MIC QC 范围为 0.06-0.25 μg/mL。如果超出此范围，首先检查 MHA 平板中二价阳离子（Ca²⁺、Mg²⁺）的实际浓度——偏离 CLSI 推荐范围（Ca²⁺ 20-25 mg/L, Mg²⁺ 10-12.5 mg/L）是导致 MIC 漂移的最常见原因。
订购信息
| 产品名称 | 大肠埃希菌标准菌株 ATCC 25922 |
|---|---|
| 拉丁名 | Escherichia coli (Migula) Castellani and Chalmers |
| 保藏中心编号 | ATCC 25922 |
| 产品形式 | 冻干粉（0 代原装），附 ATCC 检测报告（COA） |
| 供应商 | 杭州康氧医疗器械有限公司 |
技术免责声明：本文技术参数来源于公开发表的 ATCC 官方产品信息、CLSI M100 文件以及现行药典标准，仅供实验室专业人员参考。药敏试验结果受培养基品牌、接种量、孵育条件和判读方式等多种因素影响——不同实验室间的 MIC 值在 ±1 个二倍稀释度内的波动属于方法学可接受的变异范围。杭州康氧医疗器械有限公司对因使用本文信息产生的任何后果不承担责任。如需技术咨询或产品订购，请联系杭州康氧医疗器械有限公司。
参考资料
- ATCC 官网：Escherichia coli 25922 产品页与检测报告（COA）
- CLSI M100：Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing，现行版本
- CP009072：E. coli ATCC 25922 完整基因组序列（NCBI GenBank）
- EUCAST：EUCAST guidelines for detection of resistance mechanisms
- 中国药典（ChP）2020 年版：通则 1105、1106
- CLSI M07：Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests
- ATCC 25923 金黄色葡萄球菌 Staphylococcus aureus 标准菌株
- ATCC 25922 大肠埃希菌 Escherichia coli 标准菌株
- ATCC 16404 巴西曲霉（黑曲霉）Aspergillus brasiliensis 标准菌株
- ATCC 10231 白色念珠菌 Candida albicans 标准菌株
- ATCC 27853 铜绿假单胞菌 Pseudomonas aeruginosa 标准菌株
- ATCC 6538 金黄色葡萄球菌 Staphylococcus aureus 标准菌株
- ATCC 29213 金黄色葡萄球菌 Staphylococcus aureus 标准菌株
- ATCC 15531 肺炎支原体 Mycoplasma pneumoniae 标准菌株
- ATCC 19115 单核细胞增生李斯特菌 Listeria monocytogenes 标准菌株
- ATCC 4617 支气管鲍特杆菌 Bordetella bronchiseptica 标准菌株
-
ATCC 25923 金黄色葡萄球菌 Staphylococcus aureus 标准菌株
-
ATCC 25922 大肠埃希菌 Escherichia coli 标准菌株
-
ATCC 16404 巴西曲霉（黑曲霉）Aspergillus brasiliensis 标准菌株
-
ATCC 10231 白色念珠菌 Candida albicans 标准菌株
-
ATCC 27853 铜绿假单胞菌 Pseudomonas aeruginosa 标准菌株
-
ATCC 6538 金黄色葡萄球菌 Staphylococcus aureus 标准菌株
-
ATCC 29213 金黄色葡萄球菌 Staphylococcus aureus 标准菌株
-
ATCC 15531 肺炎支原体 Mycoplasma pneumoniae 标准菌株
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